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多肽与蛋白> 酶及活性检测> 生化酶
产品编号: P2396M
产品包装:100μg
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价格: ¥ 299.00
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
P2396S Recombinant Human NQO1 Protein (Powder) 20μg 99.00元
P2396M Recombinant Human NQO1 Protein (Powder) 100μg 299.00元
P2396L Recombinant Human NQO1 Protein (Powder) 500μg 999.00元

碧云天研发生产的Recombinant Human NQO1 Protein (Powder),即Recombinant Human NAD(P)H Quinone Oxidoreductase 1 (NQO1) (Powder),也称NAD(P)H:(quinone acceptor) oxidoreductase (Powder)、DT-diaphorase (Powder)或NADH-menadione reductase (Powder)等[1-3],酶学委员会编号为EC 1.6.99.2,中文名为NAD(P)H醌氧化还原酶1,是由碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的一种氧化还原酶。它是一种FAD依赖性黄素蛋白(Flavoprotein)的同源二聚体[1, 4]。本产品可以利用NADH或NADPH作为电子供体,催化醌、硝基芳香族化合物、偶氮染料等的双电子还原[4, 5]。

NQO1最受关注的作用之一是保护机体免受醌类的有害氧化和芳基化作用,它将醌直接还原为氢醌(也称对苯二酚),去除亲电醌并绕过半醌自由基和活性氧的生成,进而达到对醌的解毒作用。此外,NQO1可作为内源性辅酶Q还原酶(CoQ reductase),在防止脂质过氧化方面发挥重要作用[6]。

NQO1催化甲萘醌(Menadione)的还原反应和测活原理如下。首先NQO1以NAD(P)H为电子供体,将氧化型甲萘醌(Menadione oxidized)还原为还原型甲萘醌(Menadione reduced),同时生成NAD(P)+;在电子耦合的作用下,WST-8被还原成橙黄色的甲瓒(Formazan),Formazan在450nm附近有最大吸收峰;Formazan的生成量与NQO1的活性呈正比,因此通过测定450nm的吸收值可以非常灵敏地检测NQO1的活性。

图1.NQO1催化甲萘醌的还原反应和测活原理。

碧云天的Recombinant Human NQO1 Protein活性检测请参考图2。

图2.碧云天Recombinant Human NQO1 Protein (Powder) (P2396)活性检测效果图。使用NQO1活性检测试剂盒(P2566)检测Recombinant Human NQO1 Protein的酶活性。A. 不同酶浓度下吸光度随时间的变化曲线。B. 以图A中酶浓度为X轴,曲线线性区域的上升斜率OD450/min为Y轴,绘制出的一条反映不同酶浓度下产物OD450上升速率的直线。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

用途:高效抗氧化,对抗氧化应激。降低人类疾病的易感性。在调节特定蛋白的蛋白酶体降解方面发挥选择性“守门”作用,例如,NQO1可结合并稳定肿瘤抑制因子p53,防止其被蛋白酶体降解[4]。

来源:由大肠杆菌表达的重组蛋白,表达基因为人NQO1基因。

活性定义: One unit is defined as the amount of enzyme required to reduce 1pmol of menadione and the simultaneous reduction of WST-8 per minute at 37ºC in 50mM Tris-HCl, pH7.4.

比活力:>20000U/μg,即>20kU/mg。

纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。

酶储存液:50mM Tris-HCl (pH8.0 @ 25ºC), 1mM DTT, 50% glycerol.

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
P2396S NQO1 (Powder) 20µg
P2396M NQO1 (Powder) 100µg
P2396L NQO1 (Powder) 500µg
说明书 1份
保存条件:

-20ºC保存,一年有效。

注意事项:

酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。

可适当分装保存,多次使用,避免反复冻融。

如遇反应速率过慢的情况,也可加大酶浓度。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.请自行参考相关文献进行。
参考文献:
1.Rouh B, Seyedalipour B, Hosseinkhani S, Hosseinzadeh Colagar A. Vet Res Forum. 2022. 13(4):545-551.
2.Zhao Q, Yang XL, Holtzclaw WD, Talalay P. Proc Natl Acad Sci U S A. 1997. 94(5):1669-74.
3.Chen S, Clarke PE, Martino PA, Deng PS, Yeh CH, et al. Protein Sci. 1994. 3(8):1296-304.
4.Dinkova-Kostova A T, Talalay P. Archives of biochemistry and biophysics. 2010. 501(1):116-123.
5.Chen S, Knox R, Wu K, Deng PS, Zhou D, et al. J Biol Chem. 1997. 272(3):1437-9.
6.Ross D, Siegel D. Redox Biol. 2021. 41:101950.
7.Chamchoy K, Pakotiprapha D, Pumirat P, Leartsakulpanich U, Boonyuen U. BMC Biochem. 2019. 20(1):4.
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