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| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| D0441 | 枯草芽孢杆菌168∆4甘油菌 | 200μl | 298.00元 |
碧云天生产的枯草芽孢杆菌168∆4甘油菌(Bacillus subtilis 168∆4 Glycerol Stock)是取对数生长期的枯草芽孢杆菌168∆4菌液，加入50% (v/v)甘油使枯草芽孢杆菌处于终浓度为20% (v/v)甘油的培养基环境中制备而成。本甘油菌可以直接平板划线或小量、大量培养。
枯草芽孢杆菌是一种无致病性的革兰氏阳性菌，遗传物质是双链环状DNA，全基因组有4214810个碱基，G+C含量约43.5%，G、A、C、T分别占24%、30%、20%、26% [1]。枯草芽孢杆菌具有吸收细胞外DNA的能力、高效分泌多种蛋白酶以及分解不同的底物来适应多变环境的能力。作为一种模式微生物，它常用于研究细胞分裂、蛋白质分泌、生物膜发育、次生代谢物产生、细胞外囊泡释放和亲缘分化等[2]。随着基因工程技术的发展，枯草芽孢杆菌成为了一种重要的外源蛋白表达宿主，在农业的植物生物防治、重组蛋白生产和食品发酵等领域有着广泛的应用[2]。与其它原核表达宿主相比，枯草芽孢杆菌具有以下优势：1、细胞壁组成简单，内毒素含量较低，被美国食品药品监督管理局(Food and drug administration, FDA)认定为生物安全菌株(Generally regarded as safe, GRAS) [3, 4]；2、只有单层细胞外膜，分泌蛋白能力强[5]。
枯草芽孢杆菌在生长培养过程中会分泌很多胞外蛋白酶，容易造成目的蛋白的降解，通过基因工程的手段敲除基因组上的胞外蛋白酶基因，构建如B. subtilis WB600、WB700、WB800、WS5等胞外蛋白酶基因缺陷型的菌株，可极大程度地解决外源蛋白易降解的问题，有效提高胞外目的蛋白的浓度[6]。使用最广泛的枯草芽孢杆菌表达菌株是可以进行感受态制备和转化的168菌株及其突变体。枯草芽孢杆菌感受态制备和转化推荐选购碧云天生产的枯草芽孢杆菌感受态制备试剂盒(D0312)。
枯草芽孢杆菌约有300多个分泌蛋白，已鉴定的113个分泌蛋白中约有50%携带典型的信号肽序列[7]，为适应环境的变化，枯草芽孢杆菌进化出多种分泌途径，主要包括Sec分泌途径、双精氨酸(Two-arginine pathway, Tat)分泌途径和ATP结合转运(ATP-binding Cassette (ABC) transporter)途径等[8]。其中经典蛋白分泌途径是Sec分泌途径，例如AprE和NprE蛋白酶等都是通过Sec分泌途径分泌至胞外[5]。
枯草芽孢杆菌168∆4菌株是在野生型Bacillus subtilis 168菌株基础上，对碱性丝氨酸蛋白酶AprE基因、中性金属蛋白酶NprE基因、芽孢形成因子基因SpollAC、surfactin合成酶SrfAC基因共4个基因进行敲除而得到的蛋白酶缺陷型菌株[5]，通常使用大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒进行蛋白表达，这种质粒具有两个不同的复制起点可在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌两个受体菌株中进行复制[9]，在质粒上插入多克隆位点和选择性标记基因，就可以进行外源基因的插入，再导入相应的宿主菌株完成后续表达。
168∆4菌株的基因型为：∆spollAC ∆srfAC ∆aprE ∆nprE，该菌株采用温敏型质粒进行基因敲除，无抗性基因残留[5]。
本甘油菌适宜的生长温度是30-37ºC，可以使用常规的LB培养基进行培养。
关于碧云天不同甘油菌菌种的比较和选择，可参考我们的相关网页：http://www.beyotime.com/support/strain.htm
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D0441 | 枯草芽孢杆菌168∆4甘油菌 | 200μl |
| — | 说明书 | 1份 |
-80ºC保存，两年有效，避免反复冻融。
注意事项：使用本甘油菌时可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下，菌体会逐渐沉降至管底，请务必注意适当混匀后使用。
由于该菌株无抗性，为避免其它细菌污染，尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D0312 | 枯草芽孢杆菌感受态制备试剂盒 | 20次/100次 |
| D0441 | 枯草芽孢杆菌168∆4甘油菌 | 200μl |
| D0442 | 枯草芽孢杆菌WB800甘油菌 | 200μl |
| D2521 | Pgrac100-C-His-Cm | 1µg/100µg |
| D2522 | Pgrac100-amyQ-C-His-Cm | 1µg/100µg |
| D2523 | Pgrac100-N-His-WELQ-Cm | 1µg/100µg |
| D2524 | Pgrac100-amyQ-N-His-WELQ-Cm | 1µg/100µg |
| D2525 | Pgrac100-C-His-Tet | 1µg/100µg |
| D2526 | Pgrac100-amyQ-C-His-Tet | 1µg/100µg |
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