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| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| S0195S | Total Phosphate Detection Kit | 500次 | 336.00元 |
| S0195M | Total Phosphate Detection Kit | 2500次 | 1158.00元 |
碧云天研发生产的Total Phosphate Detection Kit (总磷酸盐检测试剂盒)，也称总磷检测试剂盒(Total Phosphate Assay Kit)，是一种通过吸光度法快速、便捷、高灵敏地测定溶液样品中总磷酸盐含量的试剂盒。本试剂盒不仅可以检测无机磷酸盐，例如磷酸氢二钠、磷酸二氢钾等，也可以检测例如AMP、ADP和ATP等有机分子中含有的磷酸。本试剂盒在检测细胞培养上清液、血清、血浆、细胞及组织裂解液等生物样品中游离的有机磷与无机磷总量方面有广泛应用。
本产品主要用于样品中有机磷与无机磷的总磷含量的检测；对于样品中游离无机磷的检测，推荐使用碧云天生产的Malachite Green Phosphate Detection Kit (S0196)。
磷主要以无机磷与有机磷两种形式存在，可参与生物体内多种代谢过程，其含量是重要的生化指标。本试剂盒总磷含量检测的主要原理是先将样品中的无机磷酸盐(Inorganic phosphate)与有机磷酸盐(Organic phosphate)在强酸、氧化剂及高温的作用下转化为游离的无机正磷酸盐(Orthophosphate)，随后孔雀绿(Malachite green)、钼酸盐(Molybate)和游离的无机正磷酸盐(Orthophosphate)形成绿色磷钼酸复合物(Molybdophosphoric acid complex)，而这种绿色磷钼酸复合物在620-640nm处的吸光度与溶液中游离的无机正磷酸盐浓度成正比例线性关系，据此可实现溶液样品中总磷含量的高效、精确检测[1]。
碧云天生产的Total Phosphate Detection Kit (S0195)检测样品总磷含量的工作流程和原理请参考图1。
图1.碧云天生产的Total Phosphate Detection Kit (S0195)检测样品总磷含量的工作流程和原理图。
本试剂盒可以用于96孔板、384孔板或比色皿中进行样品总磷含量的分析测定。
本试剂盒操作简单、检测速度快，仅需约60分钟即可完成总磷含量的测定。
本试剂盒检测灵敏度高、线性范围广，在0.1-10nmol范围内均有良好的检测灵敏度和线性关系。磷标准品在0-10nmol和0-2nmol范围内的检测效果请参考图2。
图2.碧云天生产的Total Phosphate Detection Kit (S0195)的标准曲线效果图。将磷酸盐标准品按照说明书中的描述分别稀释后，加入显色剂混匀，室温反应30分钟。在630nm处测定吸光度并最终绘制成标准曲线。图A为在0-10nmol范围内的标准曲线；图B为0-2nmol范围内的标准曲线。实际结果因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。
本试剂盒使用96孔板进行检测时，小包装足够进行500次检测，中包装足够进行2500次检测。
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| S0195S-1 | Reagent A | 20ml |
| S0195S-2 | Reagent B | 24ml |
| S0195S-3 | Reagent C | 12ml |
| S0195S-4 | 5mM Phosphate Standard | 0.4ml |
| — | 说明书 | 1份 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| S0195M-1 | Reagent A | 100ml |
| S0195M-2 | Reagent B | 120ml |
| S0195M-3 | Reagent C | 60ml |
| S0195M-4 | 5mM Phosphate Standard | 2ml |
| — | 说明书 | 1份 |
4ºC保存，一年有效；Reagent B须避光保存。
注意事项：须自备浓硫酸。浓硫酸有强腐蚀性，务必按照浓硫酸的相关操作规范，做好防护。
试剂在使用前必须回复至室温。
显色试剂须现配现用，配制后可以在4ºC保存一天。
本试剂盒如果误置于-20ºC保存等原因导致结冻，Reagent C须在95ºC加热至完全溶解并混匀后使用，其余两种试剂常规解冻并混匀后即可使用。
本实验测定波长在620-660nm之间，630nm为最佳。如果没有酶标仪，也可使用分光光度计进行测定。在这种情况下，需按比例调整试剂、样本、标准品的体积，使最终待测体积符合比色皿的最小检测体积。
本试剂盒检测时涉及氧化还原反应，因此外源氧化剂或还原剂会干扰测定的灵敏度和准确性。如果样品中含有还原剂例如DTT、巯基乙醇等，并且无法避免这些还原剂时，则应尽量控制还原剂的总浓度低于待测样品中的巯基浓度；常用的Triton X-100、Tween-20等去垢剂都含有较高水平的过氧化物，如果必须使用去垢剂，推荐使用纯度较高并注明含较低过氧化物的去垢剂。
本试剂盒使用说明所述加样体积以96孔板为例，如果选择比色皿或384孔板，应按比例调整体积。
实验室清洁剂含有高浓度的磷酸盐，需确保实验器皿彻底清洗，防止磷酸盐污染。本试剂盒的所有实验操作均须在无磷酸盐污染的条件下进行，可用全新或一次性的实验器皿进行总磷含量检测，推荐使用碧云天BeyoGold™系列无菌吸头，锥形离心管，1.5ml离心管或PCR管等实验耗材进行体外溶液样品总磷含量的检测。
为获得更好的检测效果，推荐对于所有的标准品和待测样品设置平行孔或三复孔。
如果检测出来的吸光度偏低，可能是样品中总磷含量较低，需考虑加大样品用量、降低样品的稀释比例或对制备的样品进行浓缩以加大样品用量。
Reagent A具有强氧化性和器官毒性，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内，同时必须采取一切防范措施避免与可燃物混合。
Reagent B呈强酸性，具有一定的腐蚀性，操作时请小心，并确保有效防护以避免直接接触人体，并须注意避免腐蚀其它物品。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| No. | 50μM Phosphate (μl) | H2O (μl) | Phosphate (μM) | Phosphate (nmol/200μl) |
| 1 | 0 | 200 | 0 | 0 |
| 2 | 4 | 196 | 1 | 0.2 |
| 3 | 10 | 190 | 2.5 | 0.5 |
| 4 | 20 | 180 | 5 | 1 |
| 5 | 40 | 160 | 10 | 2 |
| 6 | 80 | 120 | 20 | 4 |
| 7 | 120 | 80 | 30 | 6 |
| 8 | 160 | 40 | 40 | 8 |
| 9 | 200 | 0 | 50 | 10 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| S0192 | Phosphate Sensor Assay Kit (磷酸根荧光检测试剂盒) | 200次/1000次 |
| S0195 | Total Phosphate Detection Kit | 500次/2500次 |
| S0196 | Malachite Green Phosphate Detection Kit | 500次/2500次 |
| FPT011 | 96孔板(平底, 带盖) | 100个/箱 |
| ST876 | BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) | 100ml/500ml |
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