产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
C1737-1ml | BeyoFC™ 7-AAD染色液(50X) | 1ml | 136.00元 |
C1737-5ml | BeyoFC™ 7-AAD染色液(50X) | 5ml | 551.00元 |
碧云天的BeyoFC™ 7-AAD染色液(50X),英文名称为BeyoFC™ 7-AAD Staining Solution (50X),是一种基于远红荧光探针7-AAD (7-aminoactinomycin D)特异性染色细胞膜丧失完整性的坏死细胞的特性,从而能够特异地对坏死细胞进行荧光染色、用于流式细胞术检测时染色和排除死细胞的远红荧光染色液。
7-AAD,英文全称为7-aminoactinomycin D,中文名称叫做7-氨基放线菌素D,是一种能够嵌入核酸的荧光指示剂,形成的DNA复合物在546nm激发光下能够产生647nm的最大发射光,这一特性使其常用于多色荧光显微镜检测或流式细胞检测[1-2]。
7-AAD和碘化丙啶(PI)类似,是一种非细胞膜渗透性的荧光染料,不能穿过具有生物活性的细胞膜,因此被用来区分正常细胞与坏死细胞,也可以用于细胞固定或通透后的核酸染色。与碘化丙啶(PI)不同的是,被546nm的氩离子激光激发后,7-AAD的发射光谱较PI窄,且发射波长更长,对其它检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是PI的非常理想的替代品,可与多种488激发光激发的荧光染料联合使用,如FITC (异硫氰酸荧光素)、PE (藻红蛋白)、APC (别藻蓝蛋白)、Calcein AM等,在光谱的600nm左右有较弱的荧光,可用常规的荧光显微镜检测红色荧光,而在远红光650nm左右有较强的荧光,可用流式细胞仪FL3通道或配备650nm长通滤光片的荧光显微镜检测远红荧光。
7-AAD的分子式为C62H87N13O16,分子质量为1270.45,CAS number为7240-37-1。7-AAD与DNA结合后的最大激发光波长为546nm,最大发射光波长为647nm。7-AAD与DNA结合后的激发光与发射光光谱参考图1。
图1.7-AAD与DNA形成复合物后的激发光谱与发射光谱。
在流式细胞仪检测时,死细胞的存在可能会导致检测结果准确性降低。因为死细胞可能会与抗体发生非特异性结合,从而产生假阳性结果,并降低真实阳性信号的动态范围。同时,通常死细胞具有更高的自发荧光,且荧光信号分布广泛,这会导致较高的背景荧光,使对弱阳性样品及阳性比例较低样品的区分变得困难。常规操作中的离心、洗涤等步骤都会产生的少量死细胞,细胞活性较低的样品如非免疫组织细胞悬液、较长时间放置的血液样品等也会增加死细胞比例,因此流式实验中非常有必要通过7-AAD染色、PI染色等类似方法实现对于死细胞的荧光染色,以便于后续流式分析时排除死细胞。
本染色液已通过流式分析检测,可以简单便捷地进行细胞坏死检测,同时又不影响正常细胞的状态。使用本产品进行细胞坏死的流式细胞仪检测的效果请参考图2。
图2.碧云天BeyoFC™ 7-AAD染色液(50X) (C1737)用于坏死细胞流式检测的效果图。100万个小鼠脾脏细胞(分离后冰上保存约48小时),用100µl BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液(C1711)重悬,加入2µl本产品并染色10分钟后进行流式检测。图中可见7-AAD染色组出现了远红荧光阳性的细胞群(7-AAD组)。Control组为不加7-AAD的阴性对照。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
按照每100µl细胞重悬液使用2µl BeyoFC™ 7-AAD染色液(50X)进行检测,每1ml本产品可进行500次检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C1737-1ml | BeyoFC™ 7-AAD染色液(50X) | 1ml |
C1737-5ml | BeyoFC™ 7-AAD染色液(50X) | 5ml |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC避光保存,至少一年有效。
注意事项:如果有细菌或真菌污染,可能会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致坏死细胞的数量增加。
细胞经固定、通透和RNase处理后也可以使用7-AAD检测细胞周期,但更常用的是碘化丙啶(PI)。推荐使用碧云天的细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(C1052)、一步法细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(C1055)或BeyoFC™ PI/RNase即用型染色液(C7131)。
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
FFC005-1bag | BeyoGold™流式细胞管(5ml, 透明, 无菌) | 25个/袋 |
FFC005-20bags | BeyoGold™流式细胞管(5ml, 透明, 无菌) | 25个/袋, 20袋/箱 |
C0025-200ml | 人外周血淋巴细胞分离液 | 200ml |
C0027S | 大鼠外周血淋巴细胞分离试剂盒 | 200ml |
C0029S | 小鼠外周血淋巴细胞分离试剂盒 | 200ml |
C0031S | 兔外周血淋巴细胞分离试剂盒 | 200ml |
C0071 | BeyoClick™ EdU-488细胞增殖检测试剂盒 | 50-500次/200-2000次 |
C0075 | BeyoClick™ EdU-555细胞增殖检测试剂盒 | 50-500次/200-2000次 |
C0078 | BeyoClick™ EdU-594细胞增殖检测试剂盒 | 50-500次/200-2000次 |
C0081 | BeyoClick™ EdU-647细胞增殖检测试剂盒 | 50-500次/200-2000次 |
C1052 | 细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒 | 50次 |
C1053 | 7-AAD细胞活力检测试剂盒 | 200次/1000次 |
C1055 | 一步法细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒 | 50次/200次 |
C1062 | Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒 | 20次/50次/100次 |
C1065 | Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒 | 20次/50次/100次 |
C1067 | Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒 | 20次/50次 |
C1069 | Annexin V-mCherry细胞凋亡检测试剂盒 | 20次/50次/100次 |
C1070 | Annexin V-mCherry/SYTOX Green细胞凋亡检测试剂盒 | 20次/50次 |
C1711 | BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液 | 100ml/500ml |
C1713 | BeyoFC™流式检测细胞固定液 | 100ml/500ml |
C1715 | BeyoFC™流式检测细胞通透与洗涤液(Triton X-100) | 100ml/500ml |
C1717 | BeyoFC™流式检测细胞通透与洗涤液(Saponin) | 100ml/500ml |
C1719 | BeyoFC™流式检测细胞固定与通透缓冲液 | 100ml |
C1731 | BeyoFC™ PI/RNase即用型染色液 | 100ml |
C1734 | BeyoFC™ PI染色液(50X) | 0.5ml/2ml |
C1737 | BeyoFC™ 7-AAD染色液(50X) | 1ml/5ml |
C1740 | BeyoFC™ Foxp3/转录因子破膜试剂盒 | 150次 |
C1743 | BeyoFC™固定与通透试剂盒 | 200次 |
C1746 | BeyoFC™ Plus固定与通透试剂盒(含阻断剂Monensin) | 200次 |
C1749 | BeyoFC™ Plus固定与通透试剂盒(含阻断剂BFA) | 200次 |
C1752 | BeyoFC™ FcR封闭剂(Human) | 50次/200次 |
C1755 | BeyoFC™ FcR封闭剂(Anti-mouse CD16/CD32) | 50次/200次 |
C1758 | BeyoFC™小鼠脾脏单细胞悬液制备试剂盒 | 20次/100次 |
C3702 | 红细胞裂解液 | 120ml/500ml |